細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際進行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等; 適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
產(chǎn)品描述:公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,公司提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱 | 人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
英文名稱 | HumanPeritoneal:NormalPeritone alCapillaryEndothelialCells |
貨號 | CS-X3291 |
培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
?以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品:
18.75pg/ml大鼠雌激素(E)ELISA試盒Ac-LETD-AFC
0.094ng/ml大鼠雌激素受體(ER)ELISA試盒 Ac-LEHD-AMC
0.094ng/ml大鼠雌三醇(E3)ELISA試盒Ac-LEHD-AFC
0.469ng/ml大鼠雌二醇(E2)ELISA試盒Ac-IETD-pNA
0.094ng/ml大鼠雌二醇受體(ER)ELISA試盒Acetyl-(Asn30,Tyr32)- Calcitonin (8-32) (salmon I)
1.875ng/ml大鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試盒Calcitonin (8-32)(salmon I)
46.9pg/ml大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試盒 Calcitonin (salmon I)
0.188ng/ml大鼠紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)ELISA試盒Calcitonin (rat)
0.375ng/ml大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA試盒Calcitonin (porcine)
4.688pg/ml大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試盒Calcitonin (human)
人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞頂體后致密板WW域結(jié)合蛋白(PAWP)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)4-去氧基-4-氯代奧美拉唑
天冬酰胺內(nèi)肽酶(LGMN)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)外消旋4-去氧基-4-硝基奧美拉唑
三肽基肽酶Ⅰ(TPP1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)奧美拉唑砜N-氧化物
組織蛋白酶A(CTSA)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)奧美拉唑化物
前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素1(PCSK1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)6-羥基氯唑沙宗
鈉碘運輸?shù)鞍?NIS)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)6-巰基嘌呤
Smad同源物3(Smad3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)7-基-6-巰基嘌呤
轉(zhuǎn)化生長因子β受體Ⅱ(TGFβR2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)6-巰基嘌呤-2'-脫氧核苷
集落刺激因子2受體β(CSF2Rβ)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2-巰基嘌呤
δ樣蛋白1同源物(δLK1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2',3'-O-亞級-6-核苷巰基嘌呤
鳥苷環(huán)化酶激活因子2A(GUCA2A)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)6-巰基嘌呤-9-β-D-核糖呋喃核苷
骨膜蛋白(POSTN)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2-氨基-6-羥基-8-巰基嘌呤
NADH脫酶1(ND1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2-氨基-6-巰基嘌呤-9-D-核苷水合物
胞漿多聚A結(jié)合蛋白1樣蛋白(PABPC1L)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)S-基-3-代對酰氨基酚
含纈酪肽蛋白(VCP)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)4-對酰氨基酚鉀鹽
細(xì)胞分類:
一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲存的方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運輸也對細(xì)胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
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